Bioquimica

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ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE BIOQUIMICA CLINICA Verónica Briceño, Cristian Ogoño, Lenin Chuquimarca,  Xavier Celi  * UTPL, Bioquimica Clinica , Paralelo “B”, Loja-Ecuador. TEMA: Determina Determinación ción de Glucosa Glucosa , Colesterol Colesterol y Trigliceridos Trigliceridos en suero . INTRODUCCIÓN colest ster erol ol es una una sust sustan anci cia a que que se encu encuen entr tra a en todo todos s los los teji tejido dos s El cole animales, de forma especial en la bilis, en los cálculos biliares, en las grasas y, normalmente, en la sangre. El organismo necesita colesterol, pues a partir de él sintetiza hormonas y sales biliares que desempeñan un papel muy importante en la absorción de las grasas procedentes de los alimentos. Mediante un mecanismo metabólico muy preciso, el organismo mantiene en equilibrio equilibrio las cantidades cantidades de colesterol colesterol que hay en la sangre y en el hígado, hígado, pero cuando el aporte de colesterol es superior al necesario durante un tiempo prolongado, el mecanismo puede sufrir alteraciones. Los triglicéridos triglicéridos son un tipo de grasa y el cuerpo cuerpo produce algunos de ellos. ellos. Los triglicéridos también provienen del alimento que una persona come. Se puede hacer un examen de sangre, llamado nivel de triglicéridos, para medir la cantidad de éstos en la sangre. Cuando uno come, el cuerpo usa las calorías para obtener energía inmediata. in mediata. Est Este exam examen en con con frec frecue uenc ncia ia se hace hace para para dete determ rmin inar ar el ries riesgo go de desa desarr rroll ollar ar card cardiop iopat atía ía.. Un nivel nivel alto alto de trig triglic licér érid idos os pued puede e llev llevar ar a ateroesclerosis, lo cual incrementa el riesgo de ataque cardíaco y accidente cerebrovascular. La glucosa es un azúcar que es utilizado por los tejidos como forma de energía al combinarlo con el oxígeno de la respiración. Cuando comemos el azúcar en la sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por el páncreas (islotes pancreáticos). Cuando la glucosa en sangre está muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagón que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre. El análisis de la glucosa sobre todo se realiza para estudiar la posible presencia de una diabetes mellitus o sacarina. Como es una enfermedad muy compleja y con grandes repercusiones de salud es un análisis muy discriminativo y útil que se realiza de forma bastante rutinaria. MATERIALES Y METODOS COLESTEROL liquicolor El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. El indicador es la quinoneimina formada por el peróxido de hidrñogeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa. Prin Princi cipi pio o de la reacción Preparación de reactivos El RGT y STD están listos para ser usados. Muestra Se tomó un suero, pero además se puede usar plasma con heparina o EDTA. Nota: Las muestras lipémicas usualmente producen turbidez cuando se mezcla la muestra con el reactivo generando resultados elevados falsos. Esta prueba evita estos resultados erróneos por medio del factor aclarante de lípidos (LCF). El LCF aclara totalmente la turbidez causada por las muestras lipémicas. Ensayo Longitud de onda Paso de luz Temperatura medición 500 nm, Hg 546 nm 1 cm 20..25ºC o 37ºC Frente a un blanco de reactivo. Solo se requiere un blanco de reactivo por serie. Esquema de pipeteo Cálculo 1. Con factor 2. Con estándar Características de la prueba Linearidad: Es lineal hasta concentraciones de colesterol de 750 mg/dl o 19,3 mmol/1. Diluir las muestras con concentraciones más altas de colesterol 1+2 con solución salina fisiológica (NaCl 0,9%) y repetir la determinación. Multiplicar el resultado por 3. Interpretación clínica Sospechoso: sobre 220 mg/dl o 5,7 mmol/l Elevado: sobre 260mg/dl o 6,7 mmol/l GLUCOSE liquicolor Método La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona formando un complejo rojo-violeta usando la quinoneimina como indicador. Principio de la reacción Los reactivos RGT y STD vienen listos para su uso. Muestras Plasma, suero. En nuestro caso usamos suero. La glucosa es estable por 24 horas de 2 a 8ºC, si el suero o plasma es separado dentro de 30 minutos después de la toma de la muestra de sangre. Esquema de pipeteo Calculo de la concentración de la glucosa Características de la prueba Linearidad: Es lineal hasta una concentración de glucosa de 400 mg/dl o 22,2 mmol/l. Si la concentración de glucosa en la muestra es superior a estos límites diluir la muestra 1+2 con agua destilada y repetir la determinación. Multiplicar el resultado por 3. Valores normales Suero, plasma (en ayunas): 75-115 mg/dl o 4,2-6,2 mmol/l TRIGLYCERIDES liquicolor Método Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasas. El indicador es Quinoneimina formada a partir de peróxido de hidrógeno, 4-aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. Principio de la reacción Preparación de los reactivos El RGT y STD están listos para usar. Muestra Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA. Estabilidad: 3 días entre 2-8ºC 4 meses a -20ºC Esta prueba evita problemas con muestras lipémicas, ya que elimina la turbidez. Ensayo Longitud de onda Paso de luz Temperatura Medición 500 nm, Hg 546 nm 1 cm 20..25ºC o 37ºC Frente a un blanco de reactivo (Br). Solo se requiere un blanco de reactivo por serie. Esquema de pipeteo Características de la ejecución Linearidad: es lineal hasta concentraciones de triglicéridos de 1000 mg/dl 0 11,4 mmol/l. Muestras con concentración superior deben ser diluidas 1+4 con solución salina (0,9%) y repetirse. Multiplique los resultados por 5. Interpretación clínica para riesgo ateroesclerótico Sospechoso: sobre 150 mg/dl o 1,72 mmol/l Elevado: sobre 200 mg/dl 0 2,28 mmol/l RESULTADOS Y DISCUSIÓN TABLA 1. A la muestra se le realizo los examenes de Colesterol, Trigliceridos y Glucosa, y los resultados estan dados en la Tabla 1. De los cuales para el colesterol obtuvimos un resultado de 100.2 mg/dl, previo a esto se ralizo la lectura del estandar en el cual el resultado obtenido fue el esperado de 200 mg/dl que esta preestablecido por la marca comercial, la lectura del serodo fue de 365 mg/dl. Los resultados obtenidos para los trigliceridos en el estandar fue de 200 mg/dl el cual fue el esperado por estar ya preestablecido, para el serodo fue de 52,1 mg/dl, y para la muestra de 51.3 mg/dl. Los resultados obtenidos para la glucosa en el el estandar fue de 100 mg/dl el cual fue satisfactorio al verificar que era igual preestablecido, del serodo fue de 63,3 mg/dl, y de la muestra fue de 66,8 mg/dl. DISCUSIÓN: Con el resultado obtenido para el colesterol que fue de 100,2 mg/dl se puede dar un pronostico de que esta bajo, pero según la bibiografia (1) dice que los valores inferiores a 200 son recomendables, en conclusion este valor pasa como normal, algunos factores pueden influir en el resultado como el tener guardado mucho tiempo el suero y no estar guardado e las condiciones aceptables. Del resultado de los trigliceridos que fue de 51,3 mg/dl, este valor esta demasiado bajo el cual lo atribuimos a que la muestra estuvo demasiado tiempo guardado y no estuvo en las condiciones idelaes, y ademas que al momento de realizar la practica no se realizo un buen pipeteo de los reactivosa lo cual pudo afcetar considerablemente los resultados. Del resultado de glucosa que es de 66.8 mg/dl según la bibliografria (2) se presume que es una hipoglucemia ya que los valores inferiores a 70 mg/dl son sinonimo de deficiecia en la produccion de glucosa. CONCLUSIONES ξ Las pruebas de colesterol , glucosa y triglicéridos permiten el análisis COLESTEROL TRIGLICERIDOS GLUCOSA ESTANDAR 200 mg/dl 200 mg/dl 100 mg /dl SERODO 365 mg/dl 52,1 mg/dl 63,3 mg/dl MUESTRA 100,2 mg/dl 51,3 mg/dl 66, 8 mg/dl de sangre que mide la cantidad total de sustancias grasas (colesterol y triglicéridos) presente en la sangre. ξ En las muestras analizadas el colesterol esta en 100 mg/dL , la glucosa en 66.8 mg/dL y los triglicéridos en 51.5 m/dL por lo que se cree que se puede estar produciendo un desequilibrio en metabolismo que se puede presentar por una baja ingesta de carbohidratos . ξ Los altos niveles de triglicéridos afectan a la salud aumentando el riesgo aterogénico y por ende el riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares, cuando se tienen valores de triglicéridos altos, se indica una dieta baja en azúcares simples, rica en hidratos de carbono complejos y baja en grasas saturadas y trans. RECOMENDACIONES ξ Es importante tener presente el control periódico de sangre para mantener la concentración de triglicéridos en sangre, dentro de parámetros normales. ξ Se debe hacer examen de control cada 5 años. ξ Se debe atemperar los reactivos una hora antes de hacer la prueba paraqué no se alteren los resultados BIBLIOGRAFIA http://www.geosalud.com/Nutricion/colesterol.htm http://www.tuotromedico.com/temas/glucosa_en_sangre.htm http://www.grupoprevenir.es/analisis_clinicos/colesterol_en_suero.html http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000403.htm http://www.tuotromedico.com/temas/glucosa_en_sangre.htm