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UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA DE MEDICINA
INFORME DE LABORATORIO DE INMUNOLOGÍA
TÉCNICAS SIMPLES DE REACCIÓN ANTÍGENOANTICUERPO PROFESOR Dr. José Roldan
INTEGRANTES Xavier Berrezueta Lía Cristina Cajamarca Johanna Guzmán Priscila Hernandez Irma Muñoz
GRUPO 2A
21/06/2011
TÉCNICAS DE REACCIÓN ANTÍGENOANTICUERPO. OBJETIVOS: •
Explicar mediante representación esquemática e imágenes las diferentes Técnicas simples de reacción antígeno-anticuerpo.
MARCO TEÓRICO: CLASIFICACIÓN:
REACCIONES DE PRECIPITACIÓN: Detectan anticuerpos: Ig G. Las reacciones de precipitación, consisten en la formación de un compuesto no soluble, llamado precipitado, producido mezclar dos disoluciones diferentes.
al
a) Precipitación en fase líquida: Precipitados o flóculos.
b) Precipitación en fase sólida:
-Inmunodifusión simple
A la derecha se demuestra la difusión del anticuerpo (Ac) en diferentes direcciones en el Agar que contiene Antígeno (Ag). A la izquierda la concentración de anticuerpo está representada por el tamaño del halo.
-Inmunodifusión doble: Permite establecer la identidad de las reacciones serológicas a través de la formación de complejos inmunes antígeno-anticuerpo, visualizados por líneas de precipitación. Además permite de forma semicuantitativa establecer la cantidad de Ag o Ac a estudiar en las placas de agar.
Representación de identidad antígeno-anticuerpo, de izquierda a derecha, Patrón de Identidad, Identidad Parcial y No identidad.
REACCIONES DE AGLUTINACION: Detectan anticuerpos: Ig M. Las reacciones de aglutinación se pueden clasificar como directas e indirectas (pasivas). En la técnica directa, una célula o antígeno particulado insoluble, se aglutina directo por el anticuerpo. La aglutinación pasiva se refiere a la aglutinación de células recubiertas de antígeno, o partículas inertes que son acarreadores pasivos de antígenos que, de otra manera, serían solubles.
Aglutinación directa:
Tipificación Rh. Anticuerpo monoclonal anti-D + Sangre de Paciente
Aglutinación
No aglutinación
Rh positivo
Rh negativo
Proteína D
Anti-D Aglutinaión
Interpretación: Eritrocito: presencia de antígeno (proteína D)= Rh + Ausencia de antígeno = Rh -
Aglutinación directa en Dx. de Embarazo: se basa en la reacción de aglutinación antígeno/anticuerpo. Consiste en poner en contacto la orina de una mujer y un suero antigonadotrófico, que se suele obtener de un animal que ha sido inmunizado contra las gonadotropinas humanas
Interpretación: Aglutinación: presencia de HCG No aglutina: no hay HCG
Embarazo Positivo Embarazo negativo.
Aglutinación Indirecta: Mediante soportes. Ya que el anticuerpo IgM es unas 750 veces más eficaz que el IgG para la aglutinación, la presencia de grandes cantidades de IgM puede influir en los resultados de la prueba
Diagnóstico de Embarazo.
Objetivos: Determinación de niveles de Gonadotropina coriónica humana (HCG) en suero u orina, como modelo de identificación de embarazo. La actividad HCG puede determinarse mediante Inmunoanálisis: fijación del complemento, inmunoanálisis de partículas de solución coloidal, inhibición de la hemaglutinación, inhibición de la aglutinación con látex, aglutinación directa y enzimoinmunoanálisis. Los cuatro últimos mecanismos representan las pruebas de embarazo de utilización frecuente HCG: 12 mU/mL (2 primeros días), 1200-6000 (3 días), 6000 mU/mL (4 día)
Técnica:
Lectura: Anillo intensamente marcado (“donut”) en la parte superior del tubo (aglutinación) prueba negativa. Importante: El anticuerpo anti-HCG neutralizará a la HCG (orina). Interpretación: negativo.
Aglutinación: ausencia de HCG
embarazo
No aglutina: presencia de HCG
embarazo positivo.
Factor Reumatoide.
Objetivos: El motivo principal para investigar el Factor Reumatoide (FR) es la sospecha de Artritis Reumatoide presente en 75% de pacientes
Técnica: El FR son inmunoglobulinas (Ig M, Ig G, Ig A) producidas de forma aberrante por los Linfocitos B sinoviales, que ejercen su patogenicidad a través de la unión a la fracción Fc de la Ig G con la formación de inmunocomplejos, produciendo la activación del sistema de complemento, liberación de citoquinas y respuesta inflamatoria.
a) Prueba de Fijación en látex. Ig G*= Ig G + partículas de látex:
Interpretación: Fijación en látex
Factor Reumatoide positivo.
Formación de complejo inmune (Ig G + FR). No fijación en látex
Factor Reumatoide negativo
Reacción de Weil-Félix:
Prueba de reacción cruzada entre antígenos de Proteus vulgaris (OX 2, OX19 y OX K) y anticuerpos producidos contra las Rickettsias en la enfermedad del tifus.
Hemaglutinación indirecta:
Interpretación: Aglutinación
no hay anticuerpos en suero de
paciente. No aglutinación
Presencia de anticuerpo contra
el tifus.
Fijación de Complemento: el complemento posee la capacidad de unirse a los complejos antígeno anticuerpo (fijación). Esta capacidad es aprovechada en la prueba de fijación del complemento. Metodológicamente, la prueba se desarrolla en dos fases, una primera que es una reacción antígeno anticuerpo en un medio líquido y una segunda consistente en la adición de complemento, una hemolisina dependiente de complemento y eritrocitos. Si se ha producido reacción antígeno-anticuerpo, es decir, si el suero analizado contenía anticuerpos frente al antígeno, el complemento queda fijado y no puede activar la hemólisis de los glóbulos rojos.
RFC + RFC -
Prueba De Asto O Reacción De Hemoaglutinación: Detecta infección por estreptococos, usualmente de garganta o piel
Estas pruebas se basan en la capacidad de algunos patógenos (p.ej. el virus de la influenza) para causar la aglutinación de los eritrocitos. Pueden utilizarse para detectar el patógeno (pruebas de hemaglutinación) Las pruebas de hemaglutinación se utilizan con patógenos que poseen esta capacidad, generalmente virus. El ejemplo más clásico es el diagnóstico de la influenza. En esta prueba, se prepara una serie de mezclas de estreptolisina. Luego las mezclas se ponen frente a una suspensión de glóbulos rojos. El tubo con la menor cantidad de antiestreptolisina inmune que neutraliza exactamente la cantidad estándar de estreptolisina. Lo mejor es llevar a cabo dos pruebas con una semana de intervalo para ver si el título está aumentando o disminuyendo: una determinación única generalmente tiene un valor más limitado.
Interpretación: Aglutina No Aglutina
Negativo Positivo
CONCLUSIÓN: Las reacciones antígeno anticuerpo presente en la inmunitaria permite identificar diferentes patologías importancia de las técnicas e interpretaciones de las antígeno-anticuerpo para el diagnostico de las diferentes así como su prevención.
respuesta de ahí la reacciones patologías
BIBLIOGRÁFICA: 1. STITES D. et al. Inmunología Básica y Clínica. 7 ma Edición. Editorial El Manual Moderno. México D.F. 1993. Pág. 244-246. 280-283 2. MORRISON K. et al. Laboratorio clínico y pruebas de diagnóstico. 1ra Edición. Editorial El Manual Moderno, S.A. México D.F. 1998. Pág. 181182. 387. 405-407. 3. ROJAS W. Inmunología. Editorial Corporación para investigaciones biológicas. 13ra Edición. Medellín Colombia. 2001. Pág. 218
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