Universidad Católica Del Maule Establecimiento Al Cultivo In Vitro De Porlieria Chilensis (johnst.) A Partir De Embriones Maduros

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    UNIVERSIDAD CATÓLICA DEL MAULE  FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y FORESTALES ESCUELA DE INGENIERÍA FORESTAL Establecimiento al cultivo in vitro  de  Porlieria chilensis  (Johnst.) a partir de embriones maduros Profesor Guía: Karla Quiroz Bravo Informe presentado como parte de los requisitos para optar al Título de Ingeniero forestal FABIÁN ALEXANDER ROJAS NEIRA TALCA  –   CHILE AÑO 2016     A Dios  A mis padres Alicia y Juan  i ÍNDICE GENERAL  AGRADECIMIENTOS .......................................................................................................... i ÍNDICE GENERAL .............................................................................................................. ii ÍNDICE DE FIGURAS .......................................................................................................... v ÍNDICE DE TABLAS ......................................................................................................... vii RESUMEN GENERAL ..................................................................................................... viii SUMMARY ........................................................................................................................ ix 1.   INTRODUCCIÓN............................................................................................................. 1 2.   HIPÓTESIS Y OBJETIVOS ............................................................................................. 3 2.1.   Objetivo general .............................................................................................................. 3 2.2.   Objetivos específicos ...................................................................................................... 3 3.   REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA ......................................................................................... 4 3.1.   Antecedentes generales de Porlieria chilensis  (Jhonst) ............................................... 4 3.1.1.   Identificación de la especie ......................................................................................... 4 3.1.2.   Descripción de la especie ............................................................................................ 4 3.1.3.   Distribución geográfica............................................................................................... 5 3.1.4.   Tipo forestal y asociaciones vegetales ......................................................................... 5 3.1.5.   Antecedentes del desarrollo de la especie .................................................................... 6 3.2.   Escarificación ............................................................................................................. 7 3.2.1.   Escarificación química ................................................................................................ 7 3.3.   Semilla ...................................................................................................................... 8 3.4.   Germinación ............................................................................................................... 8 3.5.   Cultivo in vitro ........................................................................................................... 9 3.6.   Cultivo o rescate de embriones ................................................................................. 11 3.7.   Propagación vegetativa ............................................................................................. 12 3.8.   Desinfección y manipulación .................................................................................... 12 3.9.   Desinfección del material vegetal ............................................................................. 13 3.10.   Medios de cultivos .................................................................................................... 14 3.11.   Reguladores de crecimiento ...................................................................................... 14  ii 3.11.1.   Auxinas................................................................................................................ 15 3.11.2.   Citoquininas ......................................................................................................... 15 3.11.3.   Giberalinas ........................................................................................................... 16 3.12.   Etapas en el cultivo in vitro .................................................................................. 16   3.12.1.   Etapa 0, preparación del material ......................................................................... 16   3.12.2.   Etapa I, introducción y establecimiento ................................................................ 17   3.12.3.   Etapa II, propagación ........................................................................................... 18   3.12.4.   Etapa III, enraizamiento y preparación del explante para las condiciones ex vitro . 18   3.12.5.   Etapa IV, adaptación o aclimatación de plantas .................................................... 18   4.   MATERIAL Y MÉTODO ............................................................................................... 19   4.1.   Lugar de trabajo .......................................................................................................... 19 4.2.   Materiales ................................................................................................................... 19 4.2.1.   Materiales y equipos de laboratorio .......................................................................... 19 4.2.2.   Material vegetal ........................................................................................................ 19 4.2.3.   Desinfección del material vegetal ............................................................................. 20 4.2.4.   Condiciones generales de los ensayos ....................................................................... 20 4.3.   Efecto de diferentes tiempos de inmersión en acido sulfúrico 1M sobre el establecimiento in vitro  de Porlieria chilensis ........................................................... 20 4.3.1.   Establecimiento del material vegetal ......................................................................... 21 4.3.2.   Diseño experimental y análisis estadístico ................................................................ 22 4.4.   Efectos de diferentes concentraciones de Zeatina sobre el establecimiento in vitro  de Porlieria chilensis .................................................................................................... 22 4.4.1.   Establecimiento del material vegetal ......................................................................... 23 4.4.2.   Diseño experimental y análisis estadístico ................................................................ 23 4.5.   Efectos de diferentes reguladores de crecimiento sobre la multiplicación in vitro  de Porlieria Chilensis.................................................................................................... 24 4.5.1.   Manejo del material vegetal ...................................................................................... 24 4.5.2.   Diseño experimental y análisis estadístico ................................................................ 25 5.   RESULTADOS Y DISCUSIONES .......................................................................... 26 5.1.   Evaluación de los efectos de diferentes tiempos de inmersión en acido sulfúrico 1M sobre el establecimiento in vitro  de Guayacán  .................................................... 26   5.1.1.   Efecto del acido sulfúrico 1M sobre la germinación en el establecimiento in vitro .... 26  iii 5.1.2.   Contaminación en el establecimiento in vitro de Porlieria chilensis  .......................... 28 5.2.   Evaluación de los efectos de diferentes concentraciones de Zeatina sobre el establecimiento in vitro  de Porlieria chilensis , familia Tipay 21,  .............................. 29 5.2.1.   Efectos de las distintas concentraciones de Zeatina sobre la germinación en el establecimiento in vitro de Tipay 21  ......................................................................... 29 5.2.2.   Contaminación en el establecimiento in vitro  de Porlieria chilensis , familia Tipay 21...  .......................................................................................................................... 31 5.3.   Evaluación del efecto de diferentes citoquininas (Zeatina y BAP) sobre la fase de multiplicación in vitro  de Porlieria Chilensis ........................................................... 32 6.   CONCLUSIÓN ............................................................................................................. 37 7.   BIBLIOGRAFÍA .......................................................................................................... 38