Determinacion De Pesticidas

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ESPE Carrera de Ingeniería en Biotecnología Química Ambiental NOMBRE: Paula Piedra. FECHA: 26/11/2009 1. TEMA: Métodos analíticos usados en la determinación de Aceites, Detergentes Detergentes y Plaguicidas en el agua. 2. OBJETIVOS: y Investigar todo lo referente a los métodos analítico s que se emplean en la determinación de aceites detergentes y plaguicidas en el agua. y Identificar de una manera general en que magnitud contaminan el agua estas sustancias y analizar cuan efectivos efectivos son estos métodos métodos para para la determi determi nación de las mismas. 3. MARCO TEORICO: Método de Extracción Soxhlet (Determinación de Aceites) 1. FUNDAMENTO Sólo los aceites y las grasas sólidas o viscosas presentes se separan de las muestras líquidas por filtración. Después de la extracción en un aparato Soxhlet con hexano, se pesa el residuo que queda después de la evaporación del disolvente para determinar  el contenido en aceite y grasa. Los compuestos que volatilizan a 103ºC se perderán cuando se seque el filtro. Se elige el Método Soxhlet para fracciones relativamente polares, polares, o cuando los niveles de grasas no volátiles pueden pueden amenazar el límite de solubilidad solubilidad del disolvente. disolvente. El extractor Soxhlet o simplemente simplemente Soxhlet (en honor honor a su inventor Franz von Soxhlet es un tipo de material de vidrio utilizado para la extracción de compuestos, generalmente de naturaleza lipídica, contenidos en un sólido, a través de un solvente afin. El condensador está provisto de una chaqueta de 100 mm de longitud, con espigas para la entrada y salida del agua de enfriamiento. El extractor  tiene una capacidad, hasta la parte superior del sifón, de 10 ml; el diámetro interior del extractor es de 20 mm y longitud de 90 mm. El matraz es de 500 ml de capacidad. Esta conformado por un cilindro de vidrio, vertical de aproximadamente un pie de alto y una pulgada y media de diámetro. La columna está dividida en una cámara superior e inferior. La superior o cámara de muestra sostiene un sólido o polvo del cual se extraerán compuestos. La cámara de solvente, exactamente abajo, contiene una reserva de solvente orgánico, éter o alcohol. Dos tubos vacíos, o brazos corren a lo largo, a un lado de la columna para conectar las dos cámaras. El brazo de vapor, corre en línea recta desde la part e superior de la cámara del solvente a la parte superior de la cámara del sólido. El otro brazo, para el retorno de solvente, describe dos U sobrepuestas, que llevan desde la cámara de la muestra el solvente hasta la cámara de solvente. El soxhlet funciona cíclicamente, para extraer las concentraciones concentraciones necesarias de algún determinado determinado compuesto. compuesto. Éste funciona de la siguiente siguiente forma: Cuando se evapora el solvente sube hasta el área donde es condensado; aquí, al caer  y regresar a la cámara c ámara de solvente, solvente, va separ ando ando los compu c ompuestos, estos, hasta que se llega a una concentración deseada. Esto puede ocasionar problemas con algunos compuestos, que con los ciclos llevan a la ruptura del balón, como lo es en la extracción del ámbar. 2. INTERFERENCIA I NTERFERENCIAS S El método es completamente empírico y pueden obtenerse resultados duplicados sólo con ajustarse de forma estricta a todos los detalles. Por definición, cualquier sustancia recuperada es aceite y grasa, por lo que cualquier sustancia soluble en el disolvente será extraída como aceite y grasa. La velocidad y el tiempo de extracción en el Soxhlet deben deben ser exactamente exactamente los especificados, especificados, así como el tiempo de secado y enfriado del material extraído. Puede producirse un incremento gradual de peso debido a la absorción de oxígeno, y/o una pérdida gradual de peso debido a la volatilización. 3. MATERIAL - Equipo de extracción Soxhlet. - Embudo Buchner. - Tela de muselina. - Filtro Watman 40. - Matraz de fondo redondo. - Algodón. - Dedal de extracción: papel. 4. REACTIVOS - Ácido Clorhídrico concentrado. - n-Hexano, PA, 65ºC - Suspensión de tierra de diatomea: 1 g. de tierra en 100 ml de agua destilada. 5. PROCEDIMIENTO 5.1. Toma de Muestra y Almacenamiento Recoger una muestra representativa en una botella de cristal de boca ancha aclarada con el disolvente para eliminar cualquier película de detergente, y acidúlese en el frasco de muestra con HCl concentrado hasta un pH  2. Se marca el frasco de muestra a la altura del menisco de agua para la determinación posterior del volumen de la muestra. Nota.- Recoger una muestra separada para hacer esta determinación y no subdividir en el laboratorio. 5.2. Método de Extracción de Soxhlet - Después de la preparación de la muestra, preparar dos discos de tela de muselina del - mismo diámetro que el papel de filtro ( Watman 40). Colocar el papel de filtro entre los dos discos de tela, y usando el vacío pasar  por el filtro 100 ml de tierra de diatomea; luego, se lava con tres volúmenes de 100 ml de agua destilada. Se prosigue el vacío hasta que no pase más agua a través del filtro. - Se filtra la muestra acidificada por la compresa filtrante preparada, mediante vacío, que se continúa hasta que no pase más agua por el filtro. - Confeccionar un cartucho de papel de filtro. Introducir en él algodón con suficiente hexano. Se introducen en este cartucho los filtros utilizados doblándolos con ayuda de unas pinzas en una especie de rollitos. - Limpiar el interior y la tapa de la botella de muestra y el interior del embudo de Buchner con algodón impregnado en hexano para quitar toda la película de aceite e introducirlo en el cartucho. Una vez realizada esta operación, cerrar  bien el cartucho. - Desecar el cartucho en estufa a 103ºC durante 30 min exactamente. - Tarar un matraz de fondo redondo previ amente limpiado con mezcla crómica, para eliminar todo resto de grasas, desecado en estufa durante 30 min y enfriado a temperatura ambiente en un desecador. - Colocar el cartucho desecado en el cuerpo de extracción de Sohxlet. Montar el dispositivo para la extracción, añadiendo la cantidad de hexano suficiente (unos 250 ml.). La extracción debe hacerse con una frecuencia de 20 ciclos/h durante 4 horas que se miden desde el primer ciclo. La temperatura debe mantenerse a unos 70 ºC. Concluida la extracción, eliminar el disolvente por  destilación (un rotavapor). 6. Dejar desecar el matraz y pesar (P2). CALCULOS Grasa total, en mg/l = [ ( P2 - P1 ) *1000  / VMUESTRA (L) P1. Peso bruto del matraz de extracción, en miligramos. P2. Tara del matraz de extracción, en miligramos. V MUESTRA. Volumen de muestra, determinado por relleno de la botella de muestra hasta la línea de calibración, en litros. 1 Método de partición-gravimetría Principio: El aceite o la grasa disuelta o emulsionada es extraída del agua por  íntimo contacto con el triclorotrifluoroetano. Algunas grasas y ácidos grasos especialmente no saturados, extraíbles, se oxidan con rapidez; en consecuencia, se incluyen precauciones especiales con respecto a la temperatura y desplazamiento de vapor del disolvente para reducir este efecto. Interferencias: El triclorotrifluoroetano tiene la capacidad de disolver no sólo aceite y grasas sino también otras sustancias orgánicas. Ningún disolvente conocido disolverá de forma selectiva sólo aceite y grasa. La eliminación del disolvente tiene como resultado la pérdida de los hidrocarburos de cadena corta y aromáticos encillos por volatilización. En este proceso se pierden cantidades significativas de destilados del petróleo desde la gasolina hasta el aceite combustible n.° 2. Además, los residuos más pesados del petróleo pueden contener una porción significativa de los materiales que no son extraíbles con el disolvente. 1 Baird C. 2001. ³Quimica Ambiental´ 2da Edicion. Editorial REVERTÉ. Barcelona.Pp:192-195 I nstrumental  a) Embudo de separación: 1 l, con llave de paso de TFE*. c) Baño de agua. d) Papel de filtro : diámetro 11 cm. b) Matraz de destilación: 125 ml. Reactivos a) Ácido clorhídrico, HCl, 1 + 1. c) Sulfato de sodio cristal anhidro. b) Triclorotrifluoroetano. Recójase una muestra de 1L y márquese el nivel de la muestra en la botella para determinar después el volumen de la muestra acidifíquese hasta pH 2 o inferior; en general 5 ml de HCl es suficiente. Pásese a un embudo de separación. Aclárese con cuidado la botella de muestra con 30 ml de triclorotrifluoroetano y añádanse los lavados del disolvente al embudo de separación. Es preferible agitar vigorosamente durante 2 minutos. Sin embargo, si se sospecha que se formará una emulsión estable, agítese con suavidad durante 5 a 10 minutos. Déjense que se separen las capas. Drénese la capa de disolvente a través del embudo que contenga papel de filtro humedecido con el disolvente en un matraz de destilación limpio y tarado. Si no es posible obtener una capa clara de disolvente, añádase 1 g de Na 2 SO 4 al cono del papel de filtro y drénese lentamente el disolvente emulsionado sobre los cristales.  Añádase más Na 2 SO 4 si es necesario. Háganse dos extracciones más con 30 ml de disolvente cada vez pero aclárese primero el envase de la muestra con cada fracción del disolvente. Combínense los extractos en el matraz de destilación tarado y lávese el papel de filtro con otros 10 a 20 ml del disolvente. Destílese el disolvente del matraz de destilación en un baño de agua a 70 °C. Colóquese el matraz en un baño de agua a 70 °C durante 15 minutos y extráigase aire a su través aplicando el vacío durante el minuto final. Enfríese en un desecador durante 30 minutos y pésese. Cálculos Si el disolvente orgánico está libre de resi duos, la ganancia de peso del matraz de destilación tarado se debe principalmente al aceite y la grasa. La ganancia total de peso, A, del matraz tarado menos el residuo calculado, B, del blanco del disolvente es la cantidad de aceite y grasa de la muestra: Método de partición infrarrojo   Aunque el procedimiento de extracción para este método es idéntico que para el método B, la detección infrarroja permite medir muchos hidrocarburos relativamente volátiles. Por tanto, los destilados ligeros del petróleo, con excepción de la gasolina, pueden ser medidos con exactitud. La instrumentación adecuada permite determinar  concentraciones tan pequeñas de aceite y grasa como 0,2 mg/l. Este método ofrece un cierto grado de selectividad para solventar alguna s de las interferencias de coextracción comentadas en el método B. Los residuos más pesados del petróleo pueden contener una porción significativa de materiales insolubles en el triclorotrifluoroetano. I nstrumental  a) Embudo de separación: 1 litro, con llave de cierre de TFE*. b) Espectrofotómetro infrarrojo: Doble haz, registrador. c) Células: Sílice infrarrojo próximo. d) Papel de filtro: Diámetro 11 cm. Reactivos a) Ácido clorhídrico: HCl b) Triclorotrifluoroetano c) Sulfato de sodio, anhidro. d) Aceite de referencia: Prepárese una mezcla, por volumen, del 37,5 por 100 de isooctano, el 37,5 por 100 de hexade cano y del 25 por 100 de benceno. Almacénese en un envase sellado para evitar la evaporación. Procedimiento Remítase al método B para la recogida de muestra, la acidificación y la extracción. Recójanse extractos combinados en u n matraz volumétrico de 100ml y ajustese el volumen final a 100ml, con disovente. Prepàrese una solución de reserva alrededor  de 1 ml (0,5 a 1,0 g) del aceite a un matraz volumétrico de 100 ml tarado. Tápese el matraz y pésese aproximando hasta el miligra mo.  Añádase disolvente para disolver y diluir hasta la marca. Si la identidad del aceite es desconocida utilícese un aceite de referencia como patrón. Usando las técnicas volumétricas, prepárese una serie de patrones que cubran el intervalo de interés. Selecciónese un par de células de sílice de infrarrojo próximo equiparables. Una célula de longitud de trayectoria de 1 cm es apropiada para un intervalo de funcionamiento de aproximadamente 4 a 40 mg. Examínense los patrones y las muestras desde 3.200 cm -1 hasta 2.700 cm -1 con disolvente en el haz de referencia y anótense los resultados en el papel de absorbancia. Mídanse las absorbancias de las muestras y los patrones construyendo una línea base recta en todo el intervalo de estudio, midiendo la absorbancia de l pico máximo a 2.930 cm -1 y restando la absorbancia de la línea base en este punto. Si la absorbancia es superior a 0,8 para una muestra, selecciónese una longitud de trayectoria más corta o dilúyase si es necesario. Léase la absorbancia de los patrones en el mismo intervalo para una curva de calibración. 2 Cálculos Método de Sustancias Activas al Azul de Metileno (SAAM) (Identificación de Detergentes) La mayoría de los detergentes sintéticos son contaminantes persistentes debido a que no son descompuestos fácilmente por la acción bacteriana. A los detergentes que no son biodegradables se les llama detergentes duros y a los degradables, detergentes bland os. El poder contaminante de los detergentes se manifiesta en los vegetales acuáticos inhibiendo el proceso de la fotosíntesis originando la muerte de la flora y la fauna acuáticas. A los peces les produce lesiones en las branquias, dificultándoles la respiración y provocándoles la muerte. Y por otro lado los detergentes por poseer  moléculas nutrientes, como el fosfato, ocasionan la Eutrofización cultural del agua. Las industrias pueden presentar este contaminante en sus aguas residuales siempre y 2 J. Romero. Colombia 2000 ³Calidad del agua´ 2da edición. Pp.:301-303 cuando utili cen es tos oductos como agentes de limp ieza , especialmen te con fi nes de desengrase. En la industr ia agroalimen tar ia po r  e jemp lo , es más f recuente la u tilizac i n de de tergentes ca ti nicos sa les cua ternar ias de amon io) a ue se necesita man tener  asepsia en los procesos de e laboraci n . os de tergentes an i nicos son uno de los posibles con tam inan tes encontrados en las aguas res idua les , adquir iendo especial re levancia en las aguas de tipo domésticas Para de term inar  de tergentes an i nicos se utili za e l  Azul de e til eno SAA ). as SAA éo t do de Sus tanc ias Activa s al llevan a cabo la transf erencia de l azu l de me til eno , un tin te ca ti nico , desde una so luc i n acuosa a un líqu ido orgánico inmiscible, as ta e l equ ili br io . Esto ocurre a través de la f ormaci n deun par  i nico en tre el an i n SAA e l ca ti n Azul de etil eno . a in tens idad de co lor  azu l resultan te en la f ase orgánica es una med ida de las SAA . os sur f ac tan tes an i nicos se encuentran en tre las más des tacadas de las sus tanc ias que muestran ac tividad al azu l de me tileno por  lo que el mé todo es u tili zado para de term ina r  de tergentes en aguas na tura les cuan tificar  aguas residua les . omprende tres ex tracciones sucesivas en cloro f ormo a par tir  de med io acuoso ác ido que con tenga azu l de me tileno en exceso , seguida s de lavado por  con tracorr ien te con agua, la de term inac i n de l color  azu l en el clorof ormo por  espectrof otome tr ía a nm . El mé todo es ap li cab le a concentrac iones de SAA inf er iores a . mg /l. El su lf ona to de alquilbenceno li nea l SA ) es el sur f ac tan te an i nico mas u tilizado se emplea para estandarizar el método SAAM. El alquilbenceno sulfonato puede ser  identificado y cuantificado por espectrofotometría infrarroja después de la purificación. ´  Un agua natural o residual contaminada con detergentes, constituye la fase acuosa. Cuando se agrega azul de metileno se genera el par iónico Azul de Metileno -SAAM. Hasta ahí solo se tendría la fase acuosa, pero si se le agrega una porción del cloroformo, se observará la formación de dos fases, ya que este último es inmiscible con la fase acuosa. Agitando el sistema se produce la transferencia del par iónico desde la fase acuosa a la fase clorofórmica, tiñéndose esta última de color azul. La intensidad de coloración azul resulta proporcional a la concentración de detergente aniónico. Las SAAM en la fase clorofórmica se valoran por medio de determinación de absorbancia mediante es pectrofotometría. Alternativamente se puede realizar la valoración por medio de comparación visual en escala cromática. Materiales y equipos  Ampollas de decantación de 250 ml  Filtro  Matraces  Pipetas  Vasos de precipitado  Probetas  Tubos de ensayo  Espectrofotómetro Visible Reactivos  Cloroformo  Solución indicadora de fenolftaleina  Reactivo azul de metileno  Acido sulfúrico 1 N y 6 N  Solución de lavado: Ácido sulfúrico 6 N y fosfato diácido de sodio Procedimiento:  Preparación de la curva de calibración: Se prepara con solución SAL patrón.  Tamaño de la muestra: Para el análisis directo de las aguas limpias y residuales se selecciona el volumen de muestra sobre la base de la concentración de SAAM esperada: Concentración de Muestra SAAM tomada (ml) esperada (mg/l)  0.025-0.080 400 0.08-0.40 250 0.4-2.0 100 Si la concentración de SAAM esperada es superior a 2 mg/l se diluye la muestra que contenga 40 a 200 ug de SAAM hasta 100 ml con agua.  Medir 25 ml de muestra a analizar e introducir en ampolla de decantación de 250 ml. Completar con agua destilada a 100 ml.  Agregar 2 gotas de fenolftaleina. Si resulta una tonalidad rosada, acidificar  con ácido sulfúrico 6N hasta incoloro.  Medir en probeta 20 ml de solución de azul de metile no y agregar a la ampolla.  Colocar 10 ml de cloroformo medido en probeta y agitar suavemente durante 1 minuto.  Dejar reposar hasta que se separen las fases.  Separar fase clorofórmica en vaso de precipitado y desechar la fracción acuosa que queda en la ampo lla.  Agregar nuevamente la fase clorofórmica a la ampolla y, enjuagando el vaso de precipitado con 50 ml de líquido de lavado repartido en 2 o 3 alícuotas, introducirlo en la ampolla.  Agitar suavemente durante 1 minuto y dejar reposar hasta separación de fases.  Separar la capa clorofórmica, pasando por filtro, recibiendo el filtrado en matraz de 25 ml.  Enrasar el matraz con cloroformo.  Realizar lectura de concentración en espectrofotómetro 3 Miguel Aguilar Romo. 2001. Análisis De Aguas - Determinación De Sustancias Activas Al Azul De Metileno (Saam).Pp.:301-303 3 S i l i Este proceso a ísla el sur f ac tan te de la soluci n acuosa diluida produciendo un residuo seco rela tivamente li bre de sus tancias no sur f ac tan tes . Se consigue burbu jear  una corr ien te de n itrógenos muestra ac iendo ac ia arr iba en una columna que con tenga la una capa de ace ta to de e tilo po r  enc ima . El sur f ac tan te es absorbido en la inter f ase agua-gas de las burbu jas es transpor tado a la capa de ace ta to de e tilo . El d isolven te se separa, deshidra ta evapora, de jando al sur f ac tan te como res iduo adecuado para el aná lisis. Li  it  i  El proceso de cancelación solo separa los sur f actan tes disue ltos, si hay ma ter ia en par tículas es ta retiene una can tidad de l sur f ac tan te adsorbido en equ ili br io . Mater ia les a) ance lador  b) Bo tell a de lavado de gas c) Embudo de separación d) Equ ipo de filt rac ión e) eacti a) ed idor  de flu jo de gas s itrógeno b) Ace ta to de e tilo c) Bi carbonato de sod io d) loruro de Sodio e) Agua libre de sur f ac tan tes CÁLCULOS Calcular y expresar como SAAM, la concentración aparente de sulfonato de alquilbenceno lineal como se indica a continuación: SAAM, mg/L = W * 1 000 / S  W son los mg/100 mL de SAL en la muestra calculada a partir de la ecuación de la recta de la curva de calibración.  S son los mL de alícuota de la muestra. METODO DE CROMATOGRAFIA DE GASES (Determinación de Plaguicidas Organoclorados) Sus propiedades fisicosicoquímicas los hace muy resistentes a la degradación biológica, por lo que son altamente persistentes. Una vez absorbidos, los plaguicidas organoclorados pasan a la sangre y son distribuidos por todo el organismo; se establece entonces un equilibrio de concentraciones entre los elementos grasos y proteicos constitutivos de la sangre y otros tejidos ricos en grasas, especialmente el tejido adiposo. También se pueden encontrar diferentes concentraciones en el hígado, riñones y otros órganos, dependiendo de la dosis absorbida. La acumulación de estos plaguicidas en le tejido adiposo impide que lleguen a sitios críticos del sistema nervioso. Sin embargo cuando ocurre una movilización súbita de la grasa, como pueden ocurrir en situaciones de tensión o enfermedad, estos productos se movilizan también y pueden llegar a estar en la sangre en concentraciones suficientes para causar signos de intoxicación aguda. Los plaguicidas organoclorados también atraviesan la barrera placentaria y se encuentran en concentraciones importantes en el feto; a esta cantidad se le agregan las procedentes de la leche materna. Suelen aplicados en estado líquido en forma de aerosol sobre el cultivo o suelo, aunque algunas veces se incorporan directamente como sólidos (polvo o gránulos) o a través del tratamiento de las semillas. La contaminación del agua por estos se da al ser arrastrados por el agua de los campos de cultivo hasta los ríos y mares donde se introducen en las cadenas alimenticias provocando la muerte de varios organismos. La cromatografía de gases es la técnica más ampliamente empleada para el análisis multiresidual de plaguicidas, siendo, en general, capaz de conseguir los límites de detección más bajos (g/L e incluso ng/L). El cromatógrafo de gases más común para los pesticidas que contiene átomos de cloro es el detector de Captura De Electrones (ECD). La Cromatografía de fase líquida de alta resolución con detección ultra violeta-visible (HPLCDAD) también es aplicable. Un ECD posee b 5 milicurios de emisor . Dicho electrón ioniza el gas portador y se produce una ráfaga de electrones. Al tener especies orgánicas en el gas, éstas capturarán parte de los electrones, disminuyendo por tanto la intensidad de la corriente. Normalmente es necesario aplicar el potencial en forma de impulsos para lograr una respuesta lineal del detector. Este detector es muy selectivo, y es sensible a la presencia de moléculas con grupos electronegativos como halógenos, peróxidos, quinonas y grupos nitro, etc. Los pesticidas órganoclorados se encuentran presentes por lo general en aguas afectadas por evacuaciones agrícolas. Varios de los pesticidas son bioacumulativos y relativamente estables; así como agentes tóxicos y carcinógenos; por lo tanto los métodos consisten en métodos de cromatografía de gases CG según la extracción liquido-liquido de las muestras de agua, y los métodos de cromatografía de gases/ espectrometría de masas CG/EM, puede detectar todos los compuestos, además estos métodos resultan de utilidad para determinar la presencia de los bifenilos policlorados. Muestreo y preservación de muestras: Muestrear con un recipiente de vidrio de un dm³ con tapón con contratapa de teflón. La muestra se toma únicamente en la superficie del cuerpo receptor que se vá a analizar. En caso de muestras de aguas profundas se debe utilizar para el muestreo frascos Winkler. y Conservar las muestras durante el transporte a 277 K (4 0C). y Conservar las muestras en refrigeración a la misma temperatura. Para el control del método de extracción y purificación se efectúa en iguales condiciones y simultáneamente tres muestras: un blanco, un duplicado y una muestra de concentración conocida de plaguicidas organoclorados. Así mismo preparar un estandar de recuperación colocando en un tubo de centrífuga graduado de 15 cm³ la misma cantidad de solución de plaguicidas organoclorados que se usa en la preparación de la muestra de concentración conocida. Guardar este tubo en el congelador a 253 K (- 20 0C) hasta la terminación de la preparación de las muestras y en ese momento llevarlo al mismo volumen de la muestrade concentración conocida de plaguicidas organoclorados. 4 REACTIVOS Hexano (C6H14) Eter de petróleo punto de ebullición 303 K - 333 K(30ºC-60ºC) Benceno (C6H6) Cloroformo (CH3Cl)   Acetona (CH3 - CO - Iso-octano (C8H18) CH3) Cloruro de metileno Dieldrin. (CH2Cl2) Endrin. Dicloro difenil etano (DDE). DDD ó TDE. Keltano o dicofol Navarro F. A. E. 2005. Contaminantes antropogénicos en las descargas de aguas residuales de Izúcar de Matamoros y Atlixco, Puebla. Revista Internacional de Contaminación Ambiental, Pp.:721-728 4 Epóxido de heptacloro Hepatocloro Lindano (  - HCH) Metoxicloro Toxafeno Lindano ( - HCH) Heptano (C7H16) Sulfato de sodio granular y anhídro (Na2SO4) grado analítico   Agua grado plaguicida Florisil para cromatografía en columna malla 60/100 Tolueno (C6H5CH3) Plaguicidas organoclorados (98% al 100% de pureza). Se toman 3 muestras: un blanco, un duplicado y una muestra de concentración conocida de plaguicidas organoclorados. Así mismo preparar se dé estándar de recuperación colocando en un tubo de centrífuga graduado de 15 cm³ la misma cantidad de solución de plaguicidas organoclorados que se usa en la preparación de la muestra de concentración conocida. Guardar este tubo en el congelador a 20ºC, hasta la terminación de la preparación de las muestras y en ese momento llevarlo al mismo volumen de la muestra de concentración conocida de plaguicidas organoclorados. Procedimiento: Extracción:  Se mide en una probeta un dm³ de la muestra y transferirla a un embudo de separación de 2 dm³. Se agregar 100 cm³ de hexano y agitar vigorosamente al embudo durante 3 min, dejar reposar hasta que se separen las fases. Si se forma una emulsión añadir 5 cm³ de una solución saturada de sulfato de sodio.  Drenar la fase acuosa a la probeta empleada para medir la muestra. Pasar la fase orgánica a través de una columna que contenga una capa de 5 cm de altura de sulfato de sodio pretratado recibir la fase orgánica en un matraz de fondo redondo de 500 cm³.  Se transfiere nuevamente el agua de la probeta al embudo de separación, repetir  desde el inciso 10.2 con porciones de 50 cm³ de hexano dos veces y colectar los extractos de hexano en el matraz de 500 cm³.  Se concentran lentamente los extractos obtenidos de 1 a 2 cm³ con ayuda de vacío en un evaporador rotatorio. Purificación En una columna cromatográfica se coloca un tapón de lana de vidrio en el fondo y enjuagar con acetona y hexano, añadir 2 cm de altura desulfato de sodio pretratado golpeando ligeramente la columna para tener una superficie uniforme. Siguiendo el mismo procedimiento agregar 15 g de florisil desactivado al 3% y en la parte superior añadir nuevamente 2.5 cm de altura de sulfato de sodio pretratado. Con una pipeta Pasteur transferir cuantitativamente el concentrado a la columna preparada en 10.3.1 de la siguiente manera:  Pasar el contenido de un recipiente a otro usando una pipeta Pasteur. Enjuagar el primer recipiente con 2 cm³ de hexano y transferir al segundo recipiente. Repetir  esta operación por tres veces más.  Esperar a que el disolvente baje a 1 mm de la superficie de la capa superior del sulfato entre cada enjuague (nunca permitir que la columna se seque).  Enseguida del último lavado eluir el extracto que se encuentra en la columna con 200 cm³ de una mezcla benceno-hexano (1:1).  Dejar escurrir el disolvente por la pared de la columna para que no se altere la superficie del sulfato de sodio y recoger el eluato en un matraz balón de 500 cm³ con boca esmerilada 24/40. Concentrar lentamente el eluato hasta aproximadamente 1 cm³ con ayuda de vacío en un evaporador rotatorio.  Transferir el concentrado anterior cuantitativamente, como se menciona anterirormente, a un tubo de centrífuga graduado de 15 cm³ hasta completar un volumen de 10 cm³. Cualificación: Se inyecta primero el blanco, el estándar de recuperación y la muestra de concentración conocida de plaguicidas organoclorados, enseguida, inyectar en forma alternada las muestras problema y los patrones individuales de los plaguicidas cuando menos en dos columnas cromatográficas de empaque con polaridad diferente para identificar con seguridad los compuestos organoclorados que tienen cada una de las muestras. Cuantificación: La cuantificación se efectúa usando cualquiera de las dos columnas cromatográficas. Así, simultáneamente se confirma la identidad de cada plaguicida. La cuantificación se hace relacionando las alturas de los picos de las muestras con las alturas de los picos de las soluciones patrón utilizando la siguiente fórmula: Donde:  Am = Altura del pico de la muestra, en cm.  Ae = Altura del pico del patrón, en cm Vie = Volumen inyectado del patrón, en  dm³ Vim= Volumen inyectado de la muestra, en  dm³ Ce = Concentración del patrón, en g/ cm³ X = Volumen de dilución de la muestra extraída, en cm³ Vm = Volumen inicial de la muestra, en cm³  ATm = Atenuación del amplificador en la muestra  ATe = Atenuación del amplificador en el patrón 106 = Constante para transformar de g/ cm³ a mg/ dm³. 5 DIOXINAS, FURANOS, PCBs. Dioxinas.- Las Dioxinas cubren un grupo de 75 policloro dibenzo dioxinas (PCDD) congéneres y 135 policloro dibenzofuranos ( PCDF ) congéneres de los cuales 17 son de preocupación toxicológica. Bifenilos Policlorados (PCBs) son un grupo de 209 congéneres los cuales pueden ser divididos en dos grupos de acuerdo a sus propiedades toxicológicas: 12 congéneres exhiben propiedades toxicológicas similares a l as dioxinas y es por eso que son a menudo llamados PCBs con efecto Dioxina. Los análisis de dioxinas utilizan extracción por disolvente, cromatografía de líquidos antes de la Cromatografía de Gases/Espectometría de Masa de Alta Resolución, los análisis involucrarán identificación y cuantificación de las dioxinas y furanos más tóxicos y el cálculo del I-TEQ (Equivalente Tóxico Internacional) para poder comparar los límites prescritos y los níveles típicos de fondo. Basado en la separación de los distintos congéneres por cromatografía de gases y detección por espectrometría de masas (GC/MS). Para el análisis de las muestras con menor contenido en ³dioxinas´ se usan espectrómetros de masas de alta resolución (GM-H RMS) que permiten alcanzar  5 CEPIS, OPS, OMS. 1995. Pesticidas Organoclorados concentraciones de 5pg/g de grasa. El método consiste en la extracción por partición con un solo disolvente orgánico, de los plaguicidas presentes en el agua y su posterior  separación y purificación por cromatografía en columna. Finalmente su cualificación y cuantificación se hace por cromatografía gas - líquido usando un detector de captura de electrones. Durante fases diferentes del denominado proceso analítico, se sustituyen cloros congéneres PCDD/F C13-2, 3, 7, 8 para controlar el proceso y corregir pérdidas potenciales durante los diferentes pasos de preparación de muestras y análisis instrumentales. El proceso cromatográfico separa los 17 cloros congéneres tóxicos 2,3,7,8 de los no tóxicos. Los parámetros masivos espectrométricos permiten la separación entre los PCDDs y los PCDFs, entre los diferentes grados de cloración y entre los congéneres etiquetados C13 y los naturales C12. 6 PCBs.- Son determinados por técnicas cromatográficas, por lo que se requiere un tratamiento previo de la muestra. - Procedimiento de extracción a partir de la muestra de la parte lipófila, puede llevarse a cabo mediante microextracción en fase sólida, extracción sólido-líquido, Soxhlet, disco de fase sólida o microondas. - Se realiza un proceso de clean-up para eliminar los interferentes, puede hacerse por  cromatografía de permeación en gel (GPC). Los PCBs se determinan principalmente por técnicas cromatográficas, por lo que se requiere un tratamiento previo de la muestra. El primer paso consiste en un procedimiento de extracción a partir de la muestra de la parte lipófila, procedimiento que puede llevarse a cabo mediante microextracción en fase sólida, extracción sólido-líquido, Soxhlet, disco de fase sólida o microondas. Posteriormente se requiere un proceso de clean-up para eliminar los interferentes. Dicho proceso puede llevarse a cabo mediante cromatografía de permeación en gel (GPC), Florisil o ácido sulfúrico concentrado. El proceso de análisis propiamente dicho se lleva a cabo mediante un cromatógrafo de gases con detector de captura electrónica (GC-ECD), con detector de masas (GC-MS) o HPLC. R. H. Rerry, d. W. Green. España 2003 "Manual del ingeniero químico", 7ma edicion. Edit. Mac Graw Hill.Pp.:101-102 6 En la toma de muestras de agua superficial: se debe tener en cuenta que los liquidos de  Askarel son mas pesados que el agua y que los aceites minerales son mas livianos que el agua. Este hecho, ademas de otras caracteristicas de los PCBs, hace que tambien se encuentren PCBs en los sedimentos de fondo un poco después de que han ingresado al cuerpo de agua. Es posible que los métodos de muestreo sean sencillos, utilizando baldes limpios, botellas, embudos, alambres o postes sumergidos. El paso de fraccionamiento se puede efectuar aprovechando la coplanaridad de la molécula, como es el caso del fraccionamiento mediante columna de carbón grafitizado poroso (tratado en este informe), donde se retienen selectivamente los PCBs coplanares en la estructura en capas del carbón grafitizado y luego pueden ser eluidos selectivamente con disolventes de tipo aromático. También se usa separación en columnas Carbopack C/Celite, Florisil, alúmina, o columna pyrenyl-silica. El paso de fraccionamiento se puede efectuar aprovechando la coplanaridad de la molécula, como es el caso del fraccionamiento mediante columna de carbón grafitizado poroso (tratado en este informe), donde se retienen selectivamente los PCBs coplanares en la estructura en capas del carbón grafitizado y luego pueden ser eluidos selectivamente con disolventes de tipo aromático. También se usa separación en columnas Carbopack C/Celite, Florisil, alúmina, o columna pyrenyl-silica. Sus efectos perjudiciales y su alta difusión ambiental han hecho aumentar mucho el interés en su determinación en muchos tipos de muestras (tejidos, sedimentos, alimentos, etc.), pero debido a su baja concentración (del orden de ng/g en la mayoría de matrices) se requiere un procedimiento lento y costoso de tratamiento previo de la muestra, además de la necesidad de usar instrumental relativamente caro como pueden ser los cromatógrafos de gases y líquidos. Todo ello ha llevado a la necesidad de buscar métodos más simples de análisis, como pueden ser  técnicas biológicas como bioensayos e inmunoensayos. 7 Dioxinas y PCBs con efecto Dioxina. S/A.http://www.marchwood-scientific.com/MSS-SpanishPages/Dioxinas-y-PCBs-con-efecto-Dioxina/ 7 4. CONCLUSIONES: - El extractor Soxhlet es un tipo de material de vidrio utilizado para la extracción de compuestos, generalmente de naturaleza lipídica, contenidos en un sólido, a través de un solvente afin. - El método más utilizado para la detección de surfactantes en el agua es por medio del método de SAAM, ya que la mayoría de jabones y detergentes son de naturaleza aniónica, este método permite la degradación bacteriana, y permite eliminar la toxicidad de las aguas - Los plaguicidas organoclorados (OC) se encuentran ampliamente distribuidos en el ambiente terrestre y acuático, como resultado de que en las últimas dos décadas han sido utilizados constantemente para combatir plagas en la industria, la agricultura, e incluso durante las campañas de salud donde son aplicados para contrarrestar  enfermedades como la malaria. - Para determinar su presencia se utiliza el método de Cromatografía De Gases el cual consiste en la extracción por partición con un solo disolvente orgánico, de los plaguicidas presentes en el agua y su posterior separación y purificación por  cromatografía en columna. Finalmente su cualificación y cuantificación se hace por  cromatografía gas - líquido usando un detector de captura de electrones. - Los análisis de dioxinas utilizan extracción por disolvente, cromatografía de líquidos antes de la Cromatografía de Gases/Espectometría de Masa de Alta Resolución, los análisis involucrarán identificación y cuantificación de las dioxinas y furanos más tóxicos y el cálculo del I-TEQ (Equivalente Tóxico Internacional) para poder comparar  los límites prescritos y los níveles típicos de fondo - La determinación de PCDDs y PCDFs se lleva a cabo mediante Cromatografía de Gases Capilares de Alta Resolución junto con Espectrometrías de Masa de Alta Resolución, en combinación con técnicas de disolución de isótopos. 5. BIBLIOGRAFIA:  Baird C. 2001. ³Quimica Ambiental´ 2da Edicion. Editorial REVERTÉ. Barcelona. Pp: 192-195  J. Romero. Colombia 2000 ³Calidad del agua´ 2da edición. Edit. Escuela colombiana de ingeniería. Pp.:301-303  R. H. Rerry, d. W. Green. España 2003 "Manual del ingeniero químico" timo iv, 7ma edicion. Edit. Mac Graw Hill. 101-102.  Navarro F. A. E. 2005. Contaminantes antropogénicos en las descargas de aguas residuales de Izúcar de Matamoros y Atlixco, Puebla. Revista Internacional de Contaminación Ambiental.Pp.: 721-728  WEBGRAFIA:  Dioxinas y PCBs con efecto Dioxina. S/A. Recuperado el 24 de noviembre de 2009 de : http://www.marchwood-scientific.com/MSS-Spanish-Pages/Dioxinas-yPCBs-con-efecto-Dioxina/.  Miguel Aguilar  Romo. 2001. Análisis De Aguas - Determinación De Sustancias  Activas Al Azul De Metileno (Saam) En Aguas Naturales, Potables, Residuales Y Residuales Tratadas - Método De Prueba (Cancela A La Nmx-Aa-039-1980). EstadosUnidosdeMéxico.(enínea:http://www.semarnat.gob.mx/leyesynormas/Norm as%20Mexicanas%20vigentes/NMX-AA-039-SCFI-2001.pdf;Consultado:21/11/09).  Sustancias activas del azul de metileno. 2006. 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